杭州环特生物科技股份有限公司

服用一段时间供试品后，将斑马鱼固定、脱水、包埋、切片，进行H&E染色，我们观察斑马鱼各组织脏器结构病理变化。

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采用蓝光光源照射人永生化角质形成细胞HaCaT，会出现一定的细胞毒性，抑制细胞增殖。蓝光波长比紫外线长，具有较强的穿透力，能够穿透皮肤表皮抵达真皮层...

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服用/注射药物一段时间后，我们对斑马鱼整体进行观察评价，观察斑马鱼心脏、脑部、耳、下颌、眼、肝脏、肠道、躯干/尾/脊索、肌肉/体节、鳍、体长、身体着色、循环系统、身体水肿和出血等毒性反应情况，统计毒性

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我们评价斑马鱼眼毒性有4个指标：1.眼睛大小；2.眼部细胞凋亡；3.眼部血管面积；4.眼部病理切片。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用安神助眠剂组的总运动距离相对于模型对照组明显减少，能缓解斑马鱼的躁狂症。2.本实验证实了睡安片具有安神助眠功效。

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孕妇用化妆品的潜在安全性区别于常规化妆品主要体现在对化妆品的生殖毒性方面，利用斑马鱼技术可以对孕妇用化妆品进行安全性评价，主要参照GBT 35517-2017评价方法。

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以谷胱甘肽为代表的周围神经保护剂组的运动神经元轴突长度与模型对照组相比明显增加，证实了谷胱甘肽的周围神经保护功效。

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我们检测过敏有两种方法。1. 类胰蛋白酶的含量：用酶标仪检测类胰蛋白酶的含量。2. 肥大细胞数量：制作病理切片，经过过碘酸雪夫染色，肥大细胞呈蓝色，肥大细胞释放的组胺和白三烯等物质呈红色。

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正常对照组未摄入PTZ，模型对照组与安神助眠剂组都摄入了等量的PTZ（PTZ通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。安神助眠剂组在摄入PTZ前服用睡安片之类的安神助眠剂。

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免疫毒性指标有3个：（1）应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，观察中性粒细胞数量；（2）应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼，观察巨噬细胞数量（荧光强度）；（3）注射红色荧光微球，巨噬细胞吞噬微球排出体外

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